常见细胞染料介绍

细胞染料在生命科学研究中广泛用于细胞标记、活性检测、细胞器示踪、细胞周期分析等。以下是常见的细胞染料分类及详细介绍：

一、细胞膜染料

用于标记细胞膜，研究细胞形态、迁移或细胞间相互作用。

1. DiI（DiIC18(3)）  

   - 特点：亲脂性荧光染料（橙红色，Ex/Em ≈ 549/565 nm），稳定嵌入细胞膜。  

   - 应用：细胞追踪（如神经元轴突标记）、细胞融合实验。  

2. DiO（DiOC18(3)）  

   - 特点：绿色荧光（Ex/Em ≈ 484/501 nm），与DiI类似，适用于多色标记。  

3. PKH26/PKH67  

   - 特点：长效膜染料（PKH26：红色；PKH67：绿色），可用于体内外细胞追踪（如干细胞迁移）。  

4. FM 系列（如FM1-43、FM4-64）  

   - 特点：动态膜染料，标记内吞或分泌活动（常用于突触小泡研究）。  

二、细胞核染料

用于染色细胞核，分析细胞周期、凋亡或核形态。

1. DAPI（4',6-二脒基-2-苯基吲哚）  

   - 特点：蓝色荧光（Ex/Em ≈ 358/461 nm），特异性结合DNA（AT富集区）。  

   - 应用：固定细胞核染色，与荧光抗体共标。  

2. Hoechst 33342/33258  

   - 特点：活细胞穿透性核染料（蓝色荧光），Hoechst 33342更常用于活细胞成像。  

3. Propidium Iodide（PI）  

   - 特点：红色荧光（Ex/Em ≈ 535/617 nm），不能穿透活细胞膜，用于死细胞或固定细胞核染色。  

4. SYTO/SYTOX系列  

   - SYTO 9：绿色荧光，标记活细胞核酸。  

   - SYTOX Red：红色荧光，仅标记死细胞核。  

三、细胞活性染料

用于区分活细胞和死细胞或检测细胞健康状态。

1. 台盼蓝（Trypan Blue）  

   - 特点：传统死细胞染料（蓝色），被死细胞摄取，活细胞排斥。  

   - 应用：细胞计数仪检测存活率。  

2. Calcein-AM  

   - 特点：无色透膜，活细胞酯酶水解后发绿色荧光（Ex/Em ≈ 494/517 nm）。  

   - 应用：活细胞标记（常与PI联用）。  

3. FDA（荧光素二乙酸酯）  

   - 特点：类似Calcein-AM，绿色荧光，检测细胞酯酶活性。  

4. 7-AAD（7-氨基放线菌素D）  

   - 特点：红色荧光，用于流式细胞术区分活/死细胞（与Annexin V联用检测凋亡）。  

四、线粒体染料

用于研究线粒体膜电位、形态或功能。

1. JC-1  

   - 特点：膜电位依赖性染料（正常电位时形成红色聚集体；去极化时绿色单体）。  

   - 应用：检测线粒体功能（如凋亡早期变化）。  

2. MitoTracker系列  

   - MitoTracker Red/Green：长效染料（固定后保留），用于活细胞成像。  

   - MitoSOX Red：特异性检测线粒体超氧化物（氧化应激指示剂）。  

3. Rhodamine 123  

   - 特点：绿色荧光染料，膜电位依赖性积累。  

五、溶酶体染料

标记溶酶体或检测其酸性环境。

1. LysoTracker系列  

   - LysoTracker Red/Green：酸性依赖性荧光（Ex/Em ≈ 577/590 nm）。  

   - 应用：自噬研究、溶酶体定位。  

2. Acridine Orange  

   - 特点：绿色（核）和红色（溶酶体）双荧光，pH敏感性。  

六、内质网（ER）与高尔基体染料

1. ER-Tracker（如ER-Tracker Red/Green）  

   - 特点：活细胞特异性标记内质网（需低浓度使用）。  

2. BODIPY TR Ceramide  

   - 特点：标记高尔基体，红色荧光。  

七、细胞周期染料

用于流式细胞术分析细胞周期（G1/S/G2-M期）。

1. PI（碘化丙啶）  

   - 需RNase处理：仅结合DNA，通过荧光强度区分周期阶段。  

2. DRAQ5/DRAQ7  

   - 特点：远红色荧光，透膜性佳，适用于活细胞周期分析。  

3. EdU/BrdU  

   - 特点：胸苷类似物，标记增殖细胞（需点击化学或抗体检测）。  

八、钙离子（Ca²⁺）指示剂

检测细胞内钙信号。

1. Fluo-3/Fluro-4  

   - 特点：钙结合后绿色荧光增强（Ex/Em ≈ 506/526 nm）。  

2. Fura-2  

   - 特点：比率型染料（340/380 nm激发），定量钙浓度。  

九、ROS（活性氧）检测染料

1. DCFH-DA  

   - 特点：被ROS氧化后发绿色荧光（广谱ROS检测）。  

2. DHE（二氢乙啶）  

   - 特点：超氧化物特异性，氧化后红色荧光。  

根据实验需求选择合适的染料，并优化染色条件（浓度、时间、温度）以确保特异性。