AF 546 Tyramide 即用型酪胺信号放大反应试剂盒

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酪胺信号放大系统（Tyramide Signal Amplification, TSA），也称为催化报告基因沉积（Catalyzed Reporter Deposition, CARD）是一种用于检测低丰度靶标的信号放大技术，可用于免疫细胞化学（ICC）、免疫组织化学（IHC）、原位杂交（ISH）等检测方法。TSA技术可将这些常规检测方法的检测灵敏度提高50-100倍，同时还可节约一抗的用量，对于多重IHC还可降低一抗panel的设计难度。

TSA本质上是一种在辣根过氧化物酶（HRP）催化下的，位于目标蛋白或核酸附近的，酪胺衍生物的原位沉积。荧光或半抗原标记的酪胺分子在低浓度H2O2的存在下被二抗标记的HRP催化激活，产生大量的酶促反应。活化后的酪胺分子可与靶标分子及靶标分子周围的芳香类氨基酸残基 (如酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸等) 共价结合并聚集沉积，在靶标分子处形成高密度荧光信号区域或半抗原标记区域，从而将检测信号放大，实现对低丰度靶标分子的检测。

AF 546 Tyramide 即用型酪胺信号放大反应试剂盒是一款单色荧光的TSA试剂盒。AF 546 Tyramide的激发波长为541nm，发射波长为557nm，可发出黄色荧光。本试剂盒既可单独使用；也可与传统荧光染料方法结合达到多色成像的效果；还可以和本系列的其他TSA产品组合使用，以一定的顺序对同一个样本上的不同靶标进行两个或更多个TSA的标记，同样也可以达到多色成像的效果。如需与其他TSA产品组合使用，可联系客服咨询组合优化方案。

本试剂盒包含5个标准TSA反应，如需其他规格的本产品，可咨询客服。

包装清单

注意事项

• 由于TSA可能比常规荧光二抗的信号强度和灵敏度更高，在一抗浓度较高，或其特异性较低时，可能会导致较强的背景荧光。在这种情况下，可以适当调整一抗的浓度，以获得更好的信号效果。

• 对于组织样本，建议设置阴性对照或未染色的对照进行成像，以排除组织自发荧光对背景的影响。

• 本试剂盒中TSA工作液的推荐稀释比例是1:200，但较高的浓度也可能导致信号过强或背景较高。在这种情况下，建议适当调整TSA工作液的稀释比例，也可从1:100到1:1000设置稀释梯度，以找到最佳的浓度。

• 若需要做多色标记，即使用多个TSA试剂盒来标记同一样本上的不同靶标，可以依据不同TSA染料的吸收/发射波长来选择合适的染料组合，避免出现荧光信号串道。同时需要考虑依据不同的抗原密度选择合适的TSA染料，即低密度抗原使用强光染料，高密度抗原选择弱光染料。

• 对于基于TSA染料的多色标记，每个TSA反应后，都需要先对样本进行HRP猝灭或者抗体剥离。且标记的顺序对最终的成像效果也有一定的影响，可能需要反复调整以达到最佳效果。